顶空气相色谱系列讲座（15)  

人体血液中一氧化碳的分析——定性分析2

一、检材采取和保存

CO中毒惟一重要检材是血液-心血，非心包液、胸腔杂血。为防止血样凝成块，可在血样中加少许EDTA固体，因凝成块状的血定量偏低。当死亡时间长而取不出心血时，取带心包液的心血或胸腔血代替，送检时一定要对所送检材加以充分说明，使用时先离心只取用红血球多的部分，其它血清和杂质弃去。

CO中毒血可保存较长时间，不易腐败，曾有报导从埋后100 多天的尸体血液中检出CO。含CO的血样不密封或露置空气中，其血中HbCO 易被空气中氧所置换又转化为HbO2，使分析结果偏低，

一般采心血量10~20mL即可，装满容器密封低温保存。如需长期保存，为防止HbCO的损失，可于血液表面加0.5~1cm厚的液体石蜡，再密封置低温冰箱中保存。



二、一氧化碳定性分析

⒈     化学检测法

⑴ 氢氧化钠法——取含CO的血与空白血各少许均用20倍水稀释，加入等体积的30%NaOH水溶液混合，对正常空白血即出现绿褐色絮状物沉淀，对含CO的血则出现红色絮状物浮于液面，红色絮状物能逐步氧化为绿褐色絮状物，变色速度取决于CO在血中的量。

⑵ 鞣酸试验——取含CO的血与空白血各少许均用4倍水稀释，加入等体积的3%鞣酸溶液混匀放置，空白血呈灰色，含CO的血则呈桃红色，颜色保留时间较长，能辨认CO饱和度超过20%的血。

⑶ 快速加热法——取含CO的血与空白血各1mL，在沸水俗中边煮边对比观察颜色变化，正常血为褐黑色，含CO的血呈桃红色（饱和度需达30%~40%才有此颜色）

⒉     钯镜反应

基于氯化钯被CO还原为金属钯，浮在溶液表面形成金属光泽的钯膜称为钯镜。还可根据还原生成“钯镜"的程度来分析血中CO的量。

扩散盒法——在扩散盒内圈加0.5%氯化钯溶液0.5mL，外圈中加2mL检材血，立即盖上经蒸馏水湿润过的盖子，再从盖子边上的小口处滴加10滴40%的硫酸，速将盖子拧紧密封，轻轻转动扩散盒，使硫酸与检材血充分接触，如室温<5℃需水浴上稍加热，5分钟后注意观察扩散盒内圈有明显钯镜产生。

PdCl2＋CO＋H2O → Pd↓＋CO2＋HCl

为防止硫化氢的干扰，在含CO的血中加稀酸促使碳氧血红蛋白解离同时，可加入醋酸/醋酸铅除去干扰。此方法灵敏度高，但属性差点。